1. 體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠，用5% 異氟醚深度麻醉小鼠，然后2.5% 異氟醚維持麻醉。

2. 在頸部中線切開一個切口。

3. 分離右側(cè)的頸總動脈和迷走神經(jīng)。

4. 右側(cè)的頸總動脈暫時結(jié)扎。

5. 分離右側(cè)的頸外動脈和頸內(nèi)動脈，右側(cè)的頸內(nèi)動脈暫時結(jié)扎；右側(cè)的頸外動脈頭端結(jié)扎，近心端掛線備用。

6. 隨后，用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動脈上做一個小洞，然后插入線栓，近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動脈的線栓，以防止血從小洞中流出；松開右側(cè)頸內(nèi)動脈暫時的結(jié)扎線，輕輕送入線栓到大腦中動脈，當(dāng)感覺到阻力時停止，系牢線栓。

7. 縫合皮膚。

線栓法阻斷大腦中動脈的方案

8. 60min后，線栓輕輕從大腦中動脈移出，系牢頸外動脈結(jié)扎線；然后松開右側(cè)頸總動脈暫時的結(jié)扎線，小鼠進(jìn)行再灌注。

9. 48h后神經(jīng)功能評分，Garcia評分。

1）.自發(fā)性活動；

2）.四肢運(yùn)動的對稱性；

3）.前爪伸展；

4）.爬行；

5）.身體本體感覺；

6）.觸須反應(yīng)。

MCAO術(shù)前的小鼠評分在17.9±0.25分左右，缺血再灌注損傷48h后，評分在13.5±2.3分。